製品
AVIPure dsRNAクリアレジン
AVIPure® dsRNA Clearアフィニティー樹脂は、高収率の標的mRNAを維持しながら、dsRNAを100倍以上低減します。OPUS®カラムに充填済みのこのフローアフィニティークロマトグラフィー溶液は、免疫原性dsRNA副産物を除去することで、mRNA治療薬およびワクチンの安全性を向上させます。
製品の特徴
製品の純度と安全性の向上
高い標的mRNA収量
スケーラブル
mRNA製品の純度向上を目的とした効果的なdsRNA除去
二本鎖RNA（dsRNA）は、 ビトロ mRNA製造で使用されるIVT（体外転写）プロトコル。mRNAバイオ医薬品の安全性と有効性を確保するには、免疫原性dsRNAの効率的な除去が不可欠です。AVIPure dsRNA Clearアフィニティー樹脂は、mRNA調製物からdsRNA不純物を除去するための、ビーズベースのアフィニティークロマトグラフィーソリューションとして最初で唯一の製品です。この樹脂は、一本鎖RNA（ssRNA）からdsRNAを正確かつ確実に除去します。最適化されたIVTプロセスと組み合わせることで、AVIPure dsRNA Clearは、標準的な（未修飾の）ヌクレオチドを使用した場合でも、免疫原性を排除できることが研究で実証されています。OPUS®クロマトグラフィーカラムにプレパックされた状態で提供されるAVIPure dsRNAは、mRNA製造プロセスにおける拡張可能なdsRNA除去の新たな基準を確立します。
mRNA製造におけるdsRNA汚染とは何ですか？
dsRNAは、mRNA製造業者にとっていくつかの課題をもたらす重要な不純物です。このIVTの高度に免疫原性のある副産物は、炎症と体の抗ウイルス反応を引き起こします。その結果、副作用が増加するため、投与されるmRNA治療薬の用量を減らす必要があり、効果が低下します。したがって、最大の効果を得るには、 インビボの 製造工程においてdsRNAの制御が不可欠です。さらに、dsRNAは全RNAのわずか0.1%を占めるにすぎませんが、サイズ、長さ、配列がmRNAと類似しているため、mRNA原料から検出・除去することが困難です。AVIPure dsRNA Clearは、この課題に対する容易な導入と拡張性を備えたソリューションを提供します。
選択的dsRNA除去
AVIPure dsRNA Clear樹脂を用いたアフィニティー精製は、dsRNAを選択的に除去し、dsRNA濃度を100倍以上低減させ、総mRNA量の0.00007%（w/w）まで低減できることが実証されており、RNAの完全性に悪影響を与えることはありません。この樹脂はフローモードで動作するため、別途溶出工程は不要であり、mRNA原料からdsRNAを迅速かつ効果的に除去できます。
最適化されたIVTとAVIPure dsRNA Clearの組み合わせは、ルシフェラーゼレポーター細胞株アッセイによって実証されたように、免疫原性を効果的に除去することが示されています。RNAは標準的な（未修飾の）ヌクレオチドを用いて合成されました。
mRNA治療薬における免疫原性を排除する
dsRNA副産物の生成を管理するためにIVTプロセスを既に最適化している研究室にとっても、AVIPure dsRNA Clear樹脂は明確なメリットをもたらします。発表された研究では、最適化されたIVTとAVIPure dsRNA Clear樹脂の組み合わせのみが免疫原性を完全に排除し、レポーター細胞株アッセイにおいて炎症反応を誘発しないことが示されました。標準的なヌクレオチドを用いて合成された精製RNAは、より高いタンパク質発現とより健康な細胞を誘導しました。1
mRNA治療薬における免疫原性を排除する
dsRNA副産物の生成を管理するためにIVTプロセスを既に最適化している研究室にとっても、AVIPure dsRNA Clear樹脂は明確なメリットをもたらします。発表された研究では、最適化されたIVTとAVIPure dsRNA Clear樹脂の組み合わせのみが免疫原性を完全に排除し、レポーター細胞株アッセイにおいて炎症反応を誘発しないことが示されました。標準的なヌクレオチドを用いて合成された精製RNAは、より高いタンパク質発現とより健康な細胞を誘導しました。1
最適化されたIVTとAVIPure dsRNA Clearの組み合わせは、ルシフェラーゼレポーター細胞株アッセイによって実証されたように、免疫原性を効果的に除去することが示されています。RNAは標準的な（未修飾の）ヌクレオチドを用いて合成されました。
新たなmRNA解析手法におけるdsRNA除去と高精度定量のための戦略
ライス大学のケルシー・スウィングル助教授とレプリジェンのシニアサイエンティストであるナサニエル・クラーク博士によるこのウェビナーでは、AVIPure dsRNA Clear樹脂と最適化されたIVTプロセスを組み合わせることで、免疫原性を効果的に排除する方法をご紹介します。
「これは業界を変えるだろう。」
多国籍バイオ医薬品企業
「AVIPure dsRNA Clear樹脂は、mRNAプロセスにおけるdsRNAを低減しつつ、高い製品回収率を維持するための、実用的かつ効果的なフローモードオプションを提供しました。線状RNAと環状RNAの両方を含む複数のコンストラクトにおいて、ロードからフロースルーまで一貫したdsRNA除去が確認されました。Repligen社は、評価期間を通して優れた技術サポートを提供してくれました。」
―ヘザー・マロリー博士
Recipharm社 ダウンストリームプロセス開発担当シニアサイエンティスト
「これまで見てきた中で最高の技術だ。」
– 大規模なグローバル受託開発製造機関（CDMO）
「dsRNAを除去するために様々な方法を試してきましたが、これが断然最良の方法です。」
- mRNA開発に特化した欧州のCDMO
登録申請
IVT RNAからdsRNA副産物を測定および除去するための技術
二本鎖RNAの副産物は望ましくない免疫反応を引き起こす可能性があり、RNA治療において重大な懸念事項となっています。dsRNAの混入物質を測定し、除去することは、mRNA、circRNA、およびsaRNA治療の安全性と有効性を確保する上で重要です。
アフィニティークロマトグラフィーを用いたmRNA原料からの免疫原性二本鎖RNAの選択的除去
本稿では、AVIPure dsRNA Clearアフィニティー樹脂の設計と構築について説明し、免疫ノーザンブロッティングによって測定されたdsRNA副産物のサイズ分布を要約し、結合条件を最適化するためのハイスループットフィルタープレートワークフローの概要を示す。
dsRNA副産物を除去するための拡張可能な精製戦略
この記事では、mRNA 治療薬中の免疫原性 dsRNA 不純物を除去するための AVIPure dsRNA Clear アフィニティー樹脂の開発、検証および応用について説明します。
IVT RNA中のdsRNA副産物のサイズを測定するための免疫ノーザン法
この記事では、Repligen の科学者が開発した、mRNA フィード ストリーム内の dsRNA 副産物のサイズを決定する方法について説明します。
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高いmRNA回収率
AVIPure® dsRNA Clearアフィニティリガンドは、RNA二重らせんに特異的です。この樹脂は、pH 7.2～9.5の中～高塩濃度条件（>0.5 M NaCl）においてdsRNAを選択的に結合し、不純物の除去を容易にします。これにより、mRNA、環状RNA、および自己増幅RNAは通過します。選択的にmRNAの結合が最小限に抑えられ、高収率の標的mRNA回収が可能になります。溶出したリガンドを検出するための残留リガンドELISAキットもご用意しています。
AVIPure dsRNA Clearは従来の方法を凌駕する
dsRNAを除去する現在の方法としては、セルロース法と逆相高速液体クロマトグラフィー（RP-HPLC）がある。セルロース法はクロマトグラフィーカラムへの充填が難しく、大量のエタノールを使用するため、燃焼リスクを軽減するための厳重な管理が必要となる。RP-HPLC法も加熱と大量の有機溶媒を必要とする。どちらの方法もスケールアップが難しく、mRNAの回収率が低下する。
対照的に、AVIPure dsRNA Clear樹脂は、高いmRNA回収率を維持しながら、両方の方法を凌駕する性能を発揮します。ある研究では、このアフィニティー樹脂によりdsRNAレベルが270倍（2.4）に減少しました。これに対し、セルロース処理ではdsRNAが13倍、RP-HPLCでは58倍減少しました。1 同時に、アフィニティー樹脂を用いた場合、mRNAの回収率は94%であったのに対し、セルロースを用いた場合は73%であった。
高いmRNA収量を実証した
この顧客事例では、著名なmRNA開発企業がAVIPure dsRNA Clearを使用して、優れたmRNA回収率を維持しながら、dsRNAを仕様レベルまで大幅に削減することに成功しました。
dsRNAレベルの劇的な減少
顧客からは、仕様を満たすためにdsRNAレベルが着実に低下したとの報告があった。
90%以上のmRNA収量
顧客はAVIPure dsRNA Clear樹脂を使用することで、常に90%以上のmRNA収率を達成している。
一貫したスケールアップ性能
お客様の50mL OPUS® ValiChrom®カラムの性能は、10mL OPUS® MiniChrom®カラムと遜色ありません。
拡張可能なフロー型クロマトグラフィーソリューション
AVIPure dsRNA Clear樹脂は、革新的なHiPer™ベースビーズ技術を採用しています。このマクロ多孔質ビーズ構造により、ビーズの周囲と内部の両方で対流が発生し、表面積が最大化されて高い動的結合容量を実現するとともに、迅速なフロースルーもサポートします。この樹脂の動的結合容量は、0.4 mg dsRNA/mL以上です。カラムボリューム 10%の突破率で、1分間の滞留時間で最適なクリアランスを実現し、高い体積処理量を達成する。
加熱や溶剤は不要です。
従来のdsRNA除去方法とは異なり、AVIPure dsRNA Clearアフィニティー樹脂は溶媒や加熱を必要としません。必要なのは水性緩衝液のみです。
多様なmRNAワークフローに対応できる柔軟性
AVIPure dsRNA Clear樹脂は、プロセス要件に応じて、ポリdT精製前または精製後に使用できます。
多様なmRNAワークフローに対応できる柔軟性
AVIPure dsRNA Clear樹脂は、プロセス要件に応じて、ポリdT精製前または精製後に使用できます。
OPUSカラムでAVIPure dsRNA Clearを使用して効率を最大化
AVIPure dsRNA Clear樹脂は、プロセス開発からGMP生産の大規模化まで、OPUS®プレパックカラムでのみご利用いただけます。GMP対応カラムは現在、標準直径2.5cmから25cmまでご用意しており、エンジニアリングレビュー後にはより大きなフォーマットもご利用いただけます。次のステップに進む準備はできましたか？ • 今すぐ注文：当社のオンラインストアにアクセスして、AVIPure dsRNA Clearを今すぐ評価してください。 • 技術スペシャリストにご相談ください：フォームにご記入の上、お客様のニーズについてご相談いただき、専門家のアドバイスを受けてください。
まさにその通りです。IVT最適化は確かにdsRNAの低減と免疫原性の抑制に役立ちますが、Clarkらによって実証されたように、IVT最適化とアフィニティー精製を組み合わせることで、はるかに大きな効果が得られます。この2つの技術を組み合わせることで、標準的なヌクレオチドを用いて作製したmRNAが、ベースラインと比較して完全に非免疫原性となりました。
はい、可能です。Repligenのお客様は、この樹脂を使用してsaRNAの処理に成功しています。HiPerベースのビーズ構造により、非常に大きな分子でも高速流速で優れた物質移動を実現できます。
はい、AVIPure dsRNA Clearは、circRNA調製物からdsRNAを除去する際にも有効であることが示されています。
参 考
- Clark N、Kozarski M、Asci Sら。アフィニティークロマトグラフィーを用いたdsRNA副産物の除去。Molecular Therapy Nucleic Acids、2025; 36(2):102549。
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